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當前位置：首頁 > 產品中心 > 生物&化學試劑 > Western Blot實驗試劑 > PMK003、PMK0448、 PMK0575ECL發光底物檢測試劑盒（Western Blot）
詳細介紹
| 品牌 | 普美生物 | 貨號 | PMK003、PMK0448、 PMK0575 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 100ml/500ml | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 發光底物檢測 | 應用領域 | 綜合 |
一、產品規格
產品名稱：ECL發光底物檢測試劑盒（Western Blot）
品牌：普美生物
貨號：PMK003、PMK0448、 PMK0575
規格：100ml/500ml
二、產品基本介紹
ECL發光底物檢測試劑盒（Western Blot）
PMK0575：極超敏ECL發光底物檢測試劑盒（阿克級）
極超敏 ECL 發光底物檢測試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶 HRP 的抗體及其關聯的抗原，是一種可廣泛應用于免疫學實驗的化學發光試劑。由于采用了發光底物系統和高靈敏度熒光 ECL 發光試劑，極超敏 ECL 發光底物檢測試劑盒是目前靈敏的商業化熒光 ECL 檢測試劑之一，靈敏度高于常規超敏ECL 檢測試劑數千倍乃至數萬倍：(1) 具有靈敏度和高信噪比，可檢測 10～100ag 微量抗原；(2) 發光迅速且穩定，熒光可使 X 光膠片感光達 12 小時以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測；(3) 可使用更高的抗體稀釋倍數(1:2000～1:20000) ，極其節省抗體。(4)優異的性價比，更高的性能，更低的價格。
使用方法：
(1) 使用合適的方法進行 Western Blot ，直至用 PBST 洗滌二抗。注意用 HRP 標記 IgG 或用一抗-鏈親和素-Biotin-HRP 夾心法。
(2) Western Blot 后一次洗膜的同時新鮮配制發光工作液：分別取等體積的溶液 A 和 B ，放入干凈容器中混合備用。工作液宜在臨檢測前配制，室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。
(3) 用 WB 專用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜干燥。將膜置于一潔凈保鮮膜上，然后使其 浸入新配制的發光工作液(0. 1mL 發光工作液/cm2 膜)中充分接觸，室溫孵育 2 分鐘。孵育時間過長不會 增加靈敏度，有時還會導致曝光條帶異常。發光過程的本質是酶促反應，使用過少的發光工作液不利反應進行，也會導致膜上條帶曝光不均和明顯的靈敏度降低，為達節約目的可將膜剪小但勿降低發光液用量。
(4) 用 WB 專用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發光工作液，但勿洗去發光液。將膜放在兩片保鮮膜中間，隨后進行壓片檢測或化學發光成像儀檢測。
(5) 壓片檢測：將 Western Blot 膜貼在保鮮膜上，將保鮮膜折起來包裹 Western Blot 膜，去除氣泡和皺 褶，可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。將覆蓋 Western Blot 膜的保鮮膜固定在暗 盒內，蛋白帶面向上。打開 X 光膠片暗盒，暗房內壓 X 光膠片，分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘，然后定影顯影沖洗。后根據結果再調整壓片時間得到滿意的壓片結果。
(6) 化學發光成像儀檢測：將膜放置到化學發光成像儀內，參考儀器說明書進行檢測。
注意事項：
(1) 各溶液使用完后，請蓋緊瓶蓋以防失效。特別是 B 液，含有氧化劑，比較容易被還原而失效。
(2) A 液和 B 液在吸取過程中必須要更換槍頭，A 液和 B 液相互污染后會導致 A 液和 B 液逐漸失效，影響后續的使用效果。
(3) 步驟 1～4 可在日光燈下操作；但發光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。
(4) 長時間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系；曝光不足則條帶模糊。
(5) 發光工作液孵育約 2 分鐘后膜上的條帶發光。強條帶發光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶發光較弱甚 至肉眼不可見但可使 X 光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發光時間，肉眼不可見的熒光實際上可持續數小時并使 X 光膠片感光，因而弱帶可曝光 1- 10 小時。
(6) 由于極超敏發光液極其靈敏，強烈推薦大多數進口抗體起始濃度為一抗 1:2000～1:20000 ，二抗 1:10000~1:100000 。抗體濃度過高將造成高背景或沒有條帶導致失敗。
(7) 當發現極超敏 ECL 發光底物檢測試劑盒(PMK0575)的檢測靈敏度過高而影響檢測結果時，可以選擇檢測靈敏度較低一些的特超敏 ECL 發光底物檢測試劑盒(PMK003)或超敏 ECL 發光底物檢測試劑盒(PMK0448)，或者減少樣品、一抗或二抗的用量。
(8) 某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光，應選擇高質量保鮮膜。盡量使用 WB 專用鑷子或者塑料鑷子，金屬鑷子可能會造成淬滅熒光。
(9) NaN3 能抑制 HRP 活性，因此緩沖液中應避免使用 NaN3 做為防腐劑，如必需使用勿超過 0.01%。
(10) 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
(11) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作，且戴手套可以避免在印記膜上留下手印。
PMK0448：超敏ECL發光底物檢測試劑盒（飛克級）
普美克生產的超敏ECL發光底物檢測試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶（HRP）的抗體及其關聯的抗原。其原理是，蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上，以一抗及HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的ECL工作液，室溫孵育膜數分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數秒到數小時，顯影定影后蛋白質或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。
本產品采的發光底物系統，降低曝光背景的同時引入新型的氧化劑，大大提高試劑盒的穩定性，使其在室溫能穩定放置一年。本產品配制的ECL工作液衰減較慢，15min內熒光幾無減弱，檢測時產生的非特異背景非常低，也可節省抗體和待測樣品的用量，該試劑可用于PVDF膜和NC膜(硝酸纖維素膜)的Western blot免疫印跡等印跡發光顯色。除用于X光膠片，還可直接使用熒光CCD掃描。
注意事項：
1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2、本產品A液和B液均對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護避免直接接觸人體或吸入體內。本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
PMK0575：特超敏ECL發光底物檢測試劑盒（低阿克級）
特超敏ECL發光底物檢測試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關聯的抗原，是一種可廣泛應用于免疫學實驗的化學發光試劑。由于采用了的發光底物系統和高靈敏度熒光ECL發光試劑，特超敏ECL發光底物檢測試劑盒是目前靈敏的商業化熒光ECL檢測試劑之一，靈敏度高于常規超敏ECL檢測試劑數十倍乃至數百倍：
1、具有靈敏度和高信噪比，可檢測10～100fg微量抗原；
2、發光迅速且穩定，熒光可使X光膠片感光達12小時以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測；
3、可使用更高的抗體稀釋倍數(1:5000～1:20000)，極其節省抗體。
4、優異的性價比，更高的性能，更低的價格。
注意事項：
1、本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作，且戴手套可以避免在印記膜上留下手印。
三、品牌介紹
湖北普美生物科技有限公司成立于2022年，專注于生命科學領域的產品研發、生產與銷售。公司以“創新驅動、品質為先"為理念，致力于為科研人員提供高品質的科研工具和技術支持，助力生命科學研究的發展。依托的科研團隊和創新的生產技術，截至目前，公司已發表學術論文千余篇，擁有自主知識產權的超過百項。普美生物建立有的生產和質控體系，確保產品質量穩定可靠。公司主要產品涵蓋了分子生物學、細胞生物學、免疫學及生物化學等多個領域，滿足不同科研需求。此外，普美生物還積極與高校和科研機構合作，共同推動前沿技術的轉化與應用。展望未來，湖北普美生物將繼續秉持“為科學家提供可信賴的科研工具"的宗旨，力求成為生命科學領域的企業。我們期待與*的科研機構和合作伙伴攜手并進，共同為人類健康與生命科學的進步貢獻力量。
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